P2 purinoceptors signaling in fibroblasts of rat subcutaneous tissue

Mestrado em Biologia Molecular e CelularO tecido conjuntivo parece estar envolvido na génese de diversas condições patológicas. O aumento da rigidez do tecido conjuntivo, resultante da fibrose, pode constituir um factor importante no mecanismo patogénico da dor crónica resistente a fármacos (Langevin & Sherman, 2007). Por outro lado, os nucleótidos extracelulares parecem estar envolvidos na fisiopatologia da dor crónica (Burnstock, 2001). Assim, este estudo teve como objectivo averiguar o efeito dos nucleótidos de adenina e uridina na proliferação e síntese de colagénio tipo I de fibroblastos do tecido subcutâneo de rato em cultura. Os resultados obtidos mostram que a incubação com UTP (0.3-100 M, n=5) induz um aumento da proliferação e da produção de colagénio tipo I, o qual é dependente da concentração. Contrariamente, o agonista selectivo dos receptores P2Y2, o MRS 2768 (10 μM, n=3), não teve qualquer efeito no que se refere à proliferação, mas diminuiu significativamente (P<0.05) a síntese de colagénio tipo I. Uma vez que o aumento da produção de colagénio induzida pelo UTP (100 μM) foi proporcional ao aumento do número de células (proliferação celular),podemos especular que este aumento se deve ao aumento do número de células per si do que a uma maior actividade sintética de cada célula. Assim, ao normalizar os valores do colagénio tipo I em relação aos valores obtidos do MTT para os mesmos momentos/dias, deixamos de observar diferenças estatisticamente significativas entre o controlo e as células expostas ao UTP. Uma vez que os receptores P2Y2 não parecem estar envolvidos nesta resposta do UTP (100 μM), esta poderá estar a ser mediada pela activação dos receptores P2Y4 e/ou P2Y6. Considerando que o RB-2 (10 μM, n=5), um antagonista não selectivo que actua preferencialmente no subtipo de receptores P2Y4, não foi capaz de modificar a resposta induzida pelo UTP (100 μM), os receptores P2Y4 parecem também não estar envolvidos. Por outro lado, o MRS 2578 (100 nM), um antagonista selectivo dos receptores P2Y6, atenuou de forma significativa o aumento induzido pelo UTP (100 μM). A corroborar os nossos resultados, uma análise imunocitoquímica mostrou uma imunorreactividade positiva contra os receptores P2Y2 e P2Y6, mostrando um padrão de marcação citoplasmático/membranar, o qual é típico para este tipo de receptores, ao contrário do padrão nuclear exibido pelo anticorpo contra os receptores P2Y4. Relativamente ao envolvimento dos receptores sensíveis ao ADP, os resultados obtidos mostraram que o ADPβS (10-100 μM, n=3-6), um análogo estável do ADP, não parece induzir efeitos significativamente diferentes (P>0.05) na proliferação celular. Contudo, a sua incubação continuada aumentou a produção de colagénio tipo I de forma dependente da concentração (P<0.05). De modo a identificar os receptores purinérgicos envolvidos neste efeito, testamos o ADPβS (100 μM) na presença do MRS 2179 (0.3 μM), do AR-C 66096 (0.1 μM), e do MRS 2211 (10 μM), os quais antagonizam selectivamente os receptores P2Y1, P2Y12 e P2Y13, respectivamente. O efeito facilitatório induzido pelo ADPβS (100 μM) foi atenuado de forma significativa na presença do antagonista dos receptores P2Y1, o MRS 2179 (0.3 μM, n=3), sem ser afectado pelo antagonista dos receptores P2Y12, o AR- C 66096 (0.1 μM, n=3). Pelo contrário, o MRS 2211 (10 μM, n=2) potenciou o aumento da produção de colagénio induzida pelo ADPβS (100 μM), indicando assim que a síntese de colagénio tipo I induzida pelo receptor P2Y1 pode estar a ser parcialmente influenciada por uma activação síncrona do receptor inibitório P2Y13. Por último, uma análise por imunocitoquímica mostrou que estas células apresentam imunorreactividade positiva para os receptores P2Y1 e P2Y13, exibindo um padrão citoplasmático/membranar, contrariamente ao padrão nuclear dos receptores ostentado pelo anticorpo contra os receptores P2Y12. Concluindo, a remodelação da fáscia superficial induzida pelos fibroblastos parece ser regulada por um balanço entre a activação dos receptores P2Y2 e P2Y6, assim como dos receptores P2Y13 e P2Y1. Clarificar as vias que conduzem ao processo de fibrose pode representar uma oportunidade para esclarecer o seu envolvimento na patogénese da dor crónica musculo-esquelética, bem como ser útil no desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas.Connective tissue may be involved in the pathogenesis of a wide variety of disease conditions. Increased connective tissue stiffness due to fibrosis may be an important link to the pathogenic mechanism leading to drug-resistant chronic pain (Langevin & Sherman, 2007). In addition, extracellular nucleotides seem to be involved in the pathophysiology of chronic pain (Burnstock, 2001). Therefore, we aimed at investigating the effect of adenine and uridine nucleotides on the proliferation and synthesis of type I collagen by rat fibroblasts from subcutaneous connective tissue. The results showed that continuous incubation of UTP (0.3-100 M, n=5) concentration-dependently increased fibroblasts proliferation, as also increased the synthesis of type I collagen above the control levels. Conversely, the selective P2Y2 agonist, MRS 2768 (10 μM, n=3), was devoid of effect in what concerns proliferation, but significantly (P<0.05) decreased type I collagen synthesis. Since the increase in type I collagen synthesis induced by UTP (100 μM) was proportional to the increase in the amount of cells in the culture (fibroblasts proliferation), we speculated that such an increase could be related to the increase in the cell number rather than a higher synthetic activity. Thus, we performed a more detailed data analysis, in which we normalized type I collagen production taking into consideration the MTT values obtained at the same time points, and we observed no longer significant differences between control and UTP-exposed cells. Discounting the contribution of MRS 2768-sensitive P2Y2 receptors, UTP (100 μM)-induced increase in cells proliferation could be due to P2Y4 and/or P2Y6 receptor activation. Since RB-2 (10 μM, n=5), a non-selective antagonist that acts preferentially on the P2Y4 subtype, did not modify the effect of UTP (100 μM), P2Y4 does not seem to be involved. In turn, MRS 2578 (100 nM), which is a selective P2Y6 antagonist, significantly attenuated UTP (100 μM)-induced increase. To corroborate our results, an immunocytochemistry analysis showed a positive immunoreactivity against the P2Y2 and P2Y6 receptors exhibiting a cytoplasmic/membrane labeling pattern, which is typical for those receptors in many different cells, conversely to the nuclear labeling pattern exhibited by the antibody against the P2Y4. To investigate the involvement of ADP-sensitive P2 receptors on cell proliferation and extracellular matrix production, fibroblast cultures were continuously incubated with the stable ADP analogue, ADPβS (10-100 μM). Results obtained with ADPβS (10-100 μM, n=3-6) showed no significant (P>0.05) differences in fibroblast cells proliferation. However, a continuous incubation with ADPβS (10-100 μM, n=2-5) concentration-dependently increased type I collagen production by fibroblasts (P<0.05). In order to identify which purinoceptor(s) that could be mediating this effect, we tested ADPβS (100 μM) in the presence of MRS 2179 (0.3 μM), AR-C 66096 (0.1 μM), and MRS 2211 (10 μM), which antagonize selectively ADP-sensitive P2Y1, P2Y12 and P2Y13 receptors, respectively. The facilitatory effect of ADPβS (100 μM) was significantly attenuated in the presence of the P2Y1 antagonist, MRS 2179 (0.3 μM, n=3), without being affected by the P2Y12 antagonist, AR- C 66096 (0.1 μM, n=3). In contrast, MRS 2211 (10 μM, n=2) potentiated the effect of ADPβS (100 μM) on type I collagen synthesis, thus indicating that the P2Y1-receptor-induction of type I collagen synthesis may be partially counteracted by synchronous activation of the inhibitory P2Y13 receptor. Finally, an immunocytochemistry analysis showed that these cells exhibit immunoreactivity to P2Y1 and P2Y13 receptors with a cytoplasmic/membrane staining pattern, conversely to the nuclear pattern of P2Y12. Concluding, a delicate balance between the activation of P2Y2 and P2Y6, as well as P2Y13 and P2Y1 purinoceptors, might regulate fibroblast’s induced superficial fascia remodeling. Targeting the pathways leading to fibrosis may represent an opportunity to clarify its involvement in the pathogenesis of musculoskeletal chronic pain and it may be useful for designing novel therapeutic strategies to overcome this disease

Stratford Centre : reimagined playground

The following article is a collection of images looking at how youth counter cultural groups of urban dancers, skateboarders and roller skaters reappropriate a commercial space in East London and reimagine a pluralist playground. The narratives of trespass and occupation of Stratford Centre—a "private-public" space used both as a shopping centre and a 24-hour thoroughfare—are visually explored through photographs depicting moments of happiness, sharing, friendship and creative collaboration between young people. This work challenges the concepts of public space and common right to the city by unveiling the marginalisation and exclusion of these young alternative cultures and the lack of formal urban spaces for (young) people to engage in different activities—more spontaneous and recreational than the ones of work and consumption. Through subversive practices, the young people gathering at night in the underused space of the shopping centre reclaim and take back their right to socialise, express themselves and play. They suggest alternative and sensory rich ways of experiencing urban space and create possibilities of action that are not offered by the capitalist city. Driven by the desire to positively represent this vibrant and inclusive place, this body of work attempts to convey something of the atmosphere of an open space characterised by great social cohesion and performed by a community of young talented people.peer-reviewe

Project for Brazil - Considerations about the Civilizational Model for the Rural Environment of Paulista

This article presents reflections on race and the paths of economic modernization in rural S o Paulo based on other research on the subject Civilizatory models and projects were offered in order to arrive at an archetype of nation as a proposal on the meaning of land use and custom and the place reserved for blacks in the S o Paulo imagination throughout the 20th century We will make a brief contextualization to understand such transformations walking between the readings of literary works such as Urup s by Monteiro Lobato and scientific works to understand the representations regarding naturalization the social and economic legacies of the rural condition modernization economic globalization and operation of cooperatives in rural neighborhoods toda

A GÊNESE DA PAUPERIZAÇÃO DA CLASSE TRABALHADORA NA SOCIEDADE CAPITALISTA

Resumo Este artigo tem como objetivo apresentar a gênese da pauperização da classe trabalhadora no capitalismo, expondo as bases materiais do se que convencionou a chamar de “questão social”. Para o alcance desse objetivo faremos uma análise em Karl Marx dos capítulos “A Assim Chamada Acumulação Primitiva”, como também da “Lei Geral da Acumulação Capitalista”, ambos da obra O Capital. Procuraremos identificar os fundamentos da pauperização da classe trabalhadora, por intermédio da formação do exército industrial de reserva, para possibilitarmos o entendimento sobre a “questão social” em seus fundamentos ontológicos, buscando explicitar a origem de suas expressões na sociedade capitalista

CONSTITUIÇÃO DAS POLÍTICAS SOCIAIS NO CAPITALISMO E A PECULIARIDADE BRASILEIRA

RESUMO: Este estudo tem como propósito principal apresentar elementos para a discussão e análise da gênese e trajetória das políticas sociais no Estado capitalista, bem como o processo de consolidação de tais políticas na realidade brasileira. Demonstraremos, inicialmente, a conjuntura de ascensão do capitalismo monopolista, suas ações e políticas sociais dadas como respostas às problemáticas que ali emergiam. Posteriormente, abordaremos a realidade brasileira do século XX e o desenvolvimento econômico, politico e social do país atrelado à instituição das políticas sociais

SERVIÇO SOCIAL E TRABALHO: NOTAS SOBRE O ASSISTENTE SOCIAL ENQUANTO ASSALARIADO IMPRODUTIVO NO CONTEXTO DE AMPLIAÇÃO DOS SERVIÇOS SOCIAIS

Resumo Este estudo tem como propósito principal apresentar elementos para a discussão e análise do Assistente Social enquanto assalariado improdutivo e sua inserção no contexto de ampliação dos serviços sociais. Para tal objetivo, é imprescindível uma fundamentação teórica inicial do trabalho enquanto categoria fundante do ser social e do trabalho abstrato, assim como denominou Marx, que se desdobra em trabalho produtivo e trabalho improdutivo

Impacto do enfarte agudo do miocárdio no perfil de atividade física

Trabalho final de mestrado integrado em Medicina àrea cientifica de Cardiologia, apresentado á Faculdade de Medicina da Universidade de CoimbraIntrodução: A doença arterial coronária é um dos principais problemas de saúde pública nos países desenvolvidos, apresentando uma elevada morbilidade e mortalidade. A reabilitação cardíaca constitui um elemento fundamental na prevenção secundária da doença arterial coronária, sendo que a atividade física regular desempenha um papel central neste tipo de abordagem multidisciplinar. Objetivos: Comparar os níveis de atividade física antes do enfarte agudo do miocárdio e 3 meses depois, avaliando o impacto deste no perfil de atividade física do doente. Identificar os doentes com maior risco para não alcançarem os níveis de atividade física recomendados na prevenção secundária, ou seja, aqueles que mais beneficiariam da reabilitação cardíaca. Metodologia: Estudo prospetivo de 50 doentes admitidos com enfarte agudo do miocárdio numa Unidade de Cuidados Intensivos Coronários, procurando avaliar os níveis de atividade física dos doentes antes e 3 meses depois do enfarte do miocárdio, através do International Physical Activity Questionnaire (versão curta). Esta população de doentes foi dividida de forma a comparar 2 grupos: doentes com e sem melhoria do perfil de atividade física (fazendo esta divisão de acordo com a categoria de atividade física prévia e pós-enfarte do miocárdio e também em função do score IPAQ). Resultados: Após o enfarte agudo do miocárdio, 24% dos doentes melhoraram de categoria IPAQ, com apenas 10% dos doentes na categoria de atividade física baixa, metade dos doentes com atividade física moderada e 40% dos doentes na categoria de atividade física alta. Os doentes com níveis baixos de atividade após o enfarte agudo do miocárdio eram os que praticavam menos exercício previamente. Apesar da maioria dos doentes que apresentava atividade física baixa antes do enfarte do miocárdio ter melhorado de categoria, 29% desses doentes mantiveram-se na categoria de atividade física baixa. Os doentes sem melhoria do score IPAQ apresentavam doença coronária menos severa (lesões de um vaso), com tendência para um menor número de stents implantados comparativamente com os doentes que melhoraram de score após o EAM (1,0±1,0 vs 1,7±1,5, p=0,056). Conclusões: A avaliação do perfil de atividade física prévia, através de questionários, pode ser importante para identificar os doentes mais propensos a não alcançarem os níveis de atividade recomendados na prevenção secundária da doença arterial coronária, permitindo selecionar os doentes que mais beneficiariam de reabilitação cardíaca.Introduction: Coronary artery disease is a major public health problem in developed countries, with high morbidity and mortality. Cardiac rehabilitation is a key element in the secondary prevention of coronary artery disease and regular physical activity plays a central role in this type of multidisciplinary approach. Objectives: To compare levels of physical activity before acute myocardial infarction and 3 months later, evaluating its impact on physical activity profile of the patient. To identify patients at higher risk for not reaching the recommended levels of physical activity in secondary prevention, ie, those who would most benefit from cardiac rehabilitation. Methodology: Prospective study of 50 patients admitted with myocardial infarction in a Coronary Care Unit, attempting to assess levels of physical activity of patients before and 3 months after myocardial infarction, through the International Physical Activity Questionnaire (short version). This patient population was divided in order to compare two groups: patients with and without improvement of the physical activity profile (making this division according to the category of physical activity before and after myocardial infarction and also according to the IPAQ score). Results: After acute myocardial infarction, 24% of patients improved IPAQ category, with only 10% of patients in the category of low physical activity, half of patients with moderate physical activity and 40% of patients in the category of high physical activity. Patients with low levels of activity after myocardial infarction were those who practiced less exercise previously. Despite that the majority of patients who had low physical activity before myocardial infarction improved category after myocardial infarction, 29% of these patients remained in the category of low physical activity. Patients without IPAQ score improvement had less severe coronary disease (injury of one vessel), with a tendency to a smaller number of implanted stents compared with patients who improved the score after myocardial infarction (1.0±1.0 vs 1.7±1.5, p=0.056). Conclusions: The evaluation of prior physical activity profile, through questionnaires, may be important to identify patients most likely to not achieve the recommended levels of activity in the secondary prevention of coronary artery disease, allowing select patients who would most benefit from cardiac rehabilitatio

A AMPLIAÇÃO DO TRABALHO INTELECTUAL E O SETOR DE SERVIÇOS NA CONJUNTURA DA REESTRUTURAÇÃO PRODUTIVA

Tendo em vista que nas últimas décadas o sistema do capital vivencia uma crise sem precedentes que, por sua vez, como consequência direta, provoca alterações no que diz respeito às relações de produção, recoloca-se, sem lugar a dúvida, a necessidade de se continuar refletindo sobre as questões que permeiam a categoria trabalho. Neste artigo, em particular, demonstra-se que ao se expandir por diversos setores, conjugando-se com as exigências da fábrica toyotista, o trabalho intelectual assume contornos específicos. Esses, dentre outros, são os aspectos que compõe o presente estudo

Peletes de Acácia dealbata: uma oportunidade bioenergética?

Com as exigências financeiras que Portugal tem de enfrentar, a redução da importação de recursos energéticos é um dos imperativos do ponto de vista económico e energético. Pode também encarar-se como uma oportunidade de valorização de recursos com pouca aplicação, desenvolvendo novas fontes energéticas e comerciais. Este trabalho tem por objetivo a criação de peletes de biomassa utilizando espécies com conotação de infestantes como a Acácia dealbata e as cascas de frutos secos. Existem características importantes e que têm de se assegurar nos peletes. Assim, as características do material de base que interferem na qualidade dos peletes são a humidade, a força aplicada, a composição e a distribuição de partículas. Para os peletes, como matéria com interesse comercial, o importante é a humidade, a durabilidade mecânica e o quociente entre o comprimento e o diâmetro. Para testar a Acácia dealbata e as cascas de frutos secos, várias misturas foram criadas. Os peletes obtidos, são testados de forma a obter-se valores referentes à durabilidade mecânica, humidade e quociente entre o comprimento e o diâmetro. Os resultados obtidos apresentam um valor que permite a valorização industrial dos peletes produzidos. No entanto, estas matérias-primas podem ser mais estudadas posteriormente, desenvolvendo uma composição que permita a produção de peletes para uso doméstico

OS FUNDAMENTOS DO TRABALHO EM MARX: CONSIDERAÇÕES ACERCA DO TRABALHO PRODUTIVO E DO TRABALHO IMPRODUTIVO

Resumo O objetivo desse artigo é expor os fundamentos ontológicos da categoria trabalho em Marx, bem como a forma a qual o trabalho adquire na sociedade capitalista, configurando-se como trabalho abstrato que, por sua vez, se desdobra em trabalho produtivo e improdutivo. Nesse sentido, se tomará como referência algumas obras fundamentais de Marx, objetivando discorrer, ainda que de forma inicial, sobre a conceituação do trabalho produtivo e do trabalho improdutivo, enquanto categorias econômicas, próprias do modo de produção capitalista